1、直接比色法。酶活性檢測的方法指導書或試劑盒說明書中,寫有用分光光度計、分光光度計或酶標儀檢測的都屬于直接比色法。儀器:分光光度計、紫外-可見分光光"/>

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干貨:關(guān)于酶活檢測那些事(四)

儀器和耗材選擇
1、直接比色法。酶活性檢測的方法指導書或試劑盒說明書中,寫有用分光光度計、分光光度計或酶標儀檢測的都屬于直接比色法。

儀器:分光光度計、紫外-可見分光光度計、酶標儀、全波長酶標儀等;

耗材:玻璃比色皿、石英比色皿、微量石英比色皿(0.2mL、0.8mL、1.2mL等規(guī)格)、一次性比色皿(常用Fisherbrand 1.5mL)、酶標板、石英酶標板、UV酶標板等;

儀器和耗材的選擇,見圖一。

干貨:關(guān)于酶活檢測那些事(四)

 

說明1:酶標儀指可替換濾光片的多通道酶標儀。根據(jù)所測波長,選擇合適波長的濾光片,波長偏差在10nm以內(nèi)。

說明2:全波長酶標儀最好選用多通道酶標儀,在下面建議中會詳細說明。

說明3:微量比色皿有多種規(guī)格,根據(jù)反應液體積選擇合適的規(guī)格,要求反應液體積要大于等于比色皿最大體積的三分之二。

說明4:石英酶標板價格較高,易磨損,磨損后影響測定結(jié)果,通常不建議使用。

 

建議1:實驗操作不嫻熟的小伙伴,建議用分光光度計/紫外-可見分光光度計,因為他倆的光程是固定的,可以避免光程誤差(酶標板加樣不規(guī)范會有光程誤差,影響結(jié)果),而且反應體系也大,可以減少加樣量的誤差。

建議2:實驗操作很嫻熟的小伙伴,可以選用酶標儀/全波長酶標儀。既然選用了酶標儀,肯定想提高實驗效率,建議用多通道酶標儀(8通道或者12通道)。實驗中配合多通道移液器,在酶標儀上建立好程序,一次8個樣或12個樣,豈不美滋滋,注意要做重復哦。另外,注意移液器的加樣順序要和酶標儀的通道數(shù)保持一致,8通道要整列加樣,12通道要整行加樣。

建議3:單通道酶標儀,還是不建議使用了,同時測定多個樣品會有誤差,無法保證所有樣品的反應時間完全一致,還不如用分光光度計/紫外-可見分光光度計,畢竟誤差小一些。實驗室沒有分光光度計的小伙伴可以選擇使用。

 

2、酶聯(lián)免疫法(ELISA)。酶活性檢測的方法指導書或試劑盒說明書中,寫有Elisa、雙抗體一步夾心法、HRP標記等字樣的都屬于酶聯(lián)免疫法。波長多為450 nm。

儀器:酶標儀、全波長酶標儀等;

耗材:酶標板、石英酶標板、UV酶標板等;

建議耗材:酶標板。

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