總糖包括還原糖和非還原糖，還原糖是活性糖類物質(zhì)，可以通過直接化學(xué)滴定法進(jìn)行定量檢測，如葡萄糖、麥芽糖等。非還原糖是無活性的糖類物質(zhì)，可以通過水解等方式生成還原糖，如蔗糖、淀粉等。因此，總糖的測定一般通過水解的方式將食品中的糖類物質(zhì)完全水解成為還原糖后進(jìn)行定量檢測?？偺桥c還原糖檢測方法主要有滴定法、分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜法、旋光法、酶標(biāo)儀法等。
滴定法是總糖與還原糖較為常用的測定方法之一，主要有直接滴定法、高錳酸鉀滴定法、鐵氰化鉀滴定法等。其中直接滴定法是其中最為常用的方法，需要試劑用量少，檢測成本低，操作簡便;但要嚴(yán)格控制檢測條件，即控制加熱強度要在2min內(nèi)達(dá)穩(wěn)定沸騰，減少氧氣對滴定終點判斷的影響等。直接滴定法主要是通過將待測試樣滴定到已標(biāo)定的臨用時混合的斐林試劑甲液、乙液或堿性酒石酸銅甲液、乙液中，亞甲基藍(lán)為指示劑，由消耗試液體積數(shù)計算總糖與還原糖的含量，直接滴定法廣泛應(yīng)用總糖與還原糖的檢測中。
分光光度法的原理是將糖類物質(zhì)水解成還原糖，通過還原糖與顯色劑反應(yīng)生成可在紫外、可見光范圍內(nèi)有吸收峰的物質(zhì)，通過測定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)吸光值與濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，再將試液的吸光值代入曲線方程即可測定還原糖的含量。常用顯色劑有：3-5-二硝基水楊酸、蒽酮-硫酸等。其操作簡單易行、結(jié)果準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好、檢測成本低等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于各類樣品中總糖與還原糖的測定。
高效液相色譜法是根據(jù)不同分子結(jié)構(gòu)和相對分子質(zhì)量的糖類物質(zhì)與色譜柱填充物的作用力程度的差異，洗脫保留時間不同而將各糖類物質(zhì)進(jìn)行分離，并通過特定檢測器分別進(jìn)行定量檢測，常用的檢測器有示差折光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、質(zhì)譜等。高效液相色譜能夠一次分別準(zhǔn)確測定各糖類物質(zhì)的含量，如葡萄糖、果糖、木糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖等糖類物質(zhì)的含量同時測定，具有分離效率高、檢測速度快、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點。高效液相色譜法作為實驗室中高端的大型儀器設(shè)備，為大批量樣品檢測和多種糖類物質(zhì)的同時檢測，結(jié)供便捷高效的方法。
隨著檢測技術(shù)的成熟，糖類物質(zhì)的檢測方法得到推廣，使實驗人員運用起來更方便得心應(yīng)手。科米代謝也為您檢測提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
