植物產(chǎn)生的主要激素有細(xì)胞分裂素(CK)、水楊酸(SA)、茉莉酸(JA)、脫落酸(ABA)、生長素(IAA)、赤霉素(GA)、乙烯(ET)等。細(xì)胞分裂素在促進(jìn)植物細(xì)胞擴(kuò)展、分化、增殖等方面發(fā)揮著生長調(diào)節(jié)作用;生長素在植物發(fā)展過程中都發(fā)揮著重要作用;水楊酸茉莉酸可以參與植物根的發(fā)育，還可抑制病原物在植物體內(nèi)的增殖從而增強(qiáng)抗病性。
植物內(nèi)源激素是植物體內(nèi)的一種微量有機(jī)物質(zhì)，可調(diào)節(jié)植物從胚胎發(fā)育、器官生成、生物防御、脅迫耐受到生殖發(fā)育等各個方面的活動。植物內(nèi)源激素在植物各器官中呈現(xiàn)動態(tài)分布，性質(zhì)不穩(wěn)定，且含量極少，因此其測定方法既要精確又要靈敏。通常先選用合適的有機(jī)溶劑對其進(jìn)行提取，然后采用萃取或?qū)游龅玫讲糠謨艋?，再測定其含量。
目前，植物內(nèi)源激素的測定方法主要包括生物測定法、氣相色譜法、超高效液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等幾種檢測方法。其中，超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS)由于其具有分辨率高、檢出限低、高效靈敏等優(yōu)點(diǎn)，目前已成為植物激素最重要的分析方法。我們通過對葉菜類植物樣品前處理方法、色譜質(zhì)譜條件等方面摸索優(yōu)化，現(xiàn)有操作簡單、準(zhǔn)確性高、重現(xiàn)性好的較成熟方法，UPLC-MS同時測定植物組織中SA、JA、IAA、ABA等17種植物內(nèi)源激素的含量。
實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)化，首先對前處理?xiàng)l件的對比，不同的提取方式(超聲和震蕩)，提取時間長短。有研究顯示，植物內(nèi)源激素的化學(xué)結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)差異較大，且周圍共存的基體成分也比較復(fù)雜，對溫度等外界條件敏感，在各器官中呈現(xiàn)一定的動態(tài)分布。因此在該試驗(yàn)過程中，前處理提取方式及外界試驗(yàn)環(huán)境對試驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。影響較大的因素主要包括光環(huán)境、是否充分提取等。在固相萃取的整個過程中，流速的控制以及洗脫的速度對試驗(yàn)結(jié)果的影響均極大。
